مكافحة التلوث في المختبرات الطبية

في المختبر الطبي ، فإن خطر تلوث مزارع الخلايا لا يُحصى - مهما كان العمل دقيقًا. من المؤكد أنه ليس من غير المألوف أن يتم تقدير المخاطر بشكل خاطئ ، وغالبًا ما يؤدي التلوث إلى فقدان الثقافة. لذلك ، في هذه المدونة ، نود أن نلقي الضوء على كيفية اكتشاف وتجنب التلوث في خطوط الخلايا بشكل منهجي.

يتعرض كل مختبر طبي للتهديد يومًا بعد يوم
التلوث الجرثومي في مزارع الخلايا - بما في ذلك تلك المشتراة من أطراف ثالثة - ليس من غير المألوف في المختبرات. في الواقع ، العكس هو الصحيح: العديد من سلالات الخلايا المزروعة في المختبر مصابة بالميكوبلازما. تنتشر الجراثيم الفطرية الصغيرة في كل مكان ويمكن أن تنتشر في الهواء. بالطبع ، عند العمل في بيئة معقمة ، هناك مجال للخطأ البشري. من السهل أن نخطئ.

سيناريوهات الرعب في معامل زراعة الخلايا - التلوث بجميع أنواعه:
التلوث الجرثومي (البكتيريا ، الميكوبلازما ، الفطريات ، الخميرة ، إلخ.)
تلوث البروتينات الفيروسية
(البريونات)
التلوث الكيميائي (المواد المرتشحة والمستخلصات من البلاستيك والمعادن الثقيلة ، إلخ)
. التلوث بمزارع الخلايا الأخرى
من أين يأتي التلوث؟
1. ما مدى "نظافة" الثقافة الأصلية؟

غالبًا ما تبدأ المشكلات بمصدر المواد. حتى مع كل الجهود الممكنة في إنتاج الوسائط ، لا يمكن جعل بعض المواد معقمة تمامًا. لذلك ، هناك دائمًا خطر هروب الميكوبلازما من الفلتر المعقم. يمكن أن تنجو البريونات حتى من التعقيم بالبخار عند 121 درجة مئوية.

2. هل معمل العمل حقا بيئة معقمة؟

أحد الأسباب الرئيسية للتلوث المختبري هو جسم الإنسان. على سبيل المثال ، يمكن تجنب العديد من حالات التلوث المتبادل إذا تجنب فنيو المختبر التعامل مع خطوط إنتاج متعددة في نفس الوقت على المنضدة المعقمة. يمكن أن تصيب إحدى الثقافات الأخرى بسرعة إذا لم يتم التعامل مع السائل بشكل صحيح.

كذلك ، فإن التعجيل بالأشياء هو أسوأ عدو للعمل الممل. لا يجوز فتح باب حاضنة المختبر بدون سبب وطبعا لا يجب تركه مفتوحا لفترة طويلة. بغض النظر عن مقدار الوقت الذي قد يتعرضون فيه للضغط ، يجب أن يعمل فنيو المختبر على خط خلية واحد فقط في كل مرة. عند تفريغ الماصات التي يمكن التخلص منها أسفل المقعد ، يجب وضع الغطاء جانبًا بعد فكه.

3. هل تستخدم معدات المختبر الصحيحة؟

بالطبع ، حتى المعدات المستخدمة في المختبرات الطبية من الممكن تمامًا أن تسبب تلوثًا في زراعة الخلايا. لذلك ، نوصي بما يلي:

استخدام حاويات بلاستيكية خالية من الملدنات
اختر مكانًا مناسبًا للحاضنة (قد يؤدي الموقع بالقرب من حوض الغسيل إلى تلوث الصابون)
استخدم ملحقات الحاضنة المصنوعة من النحاس المعقم
عند استخدام المضادات الحيوية ، يجب أن تتم تربية الخطوط الخالية من المضادات الحيوية من وقت لآخر. (هذا لأن المضادات الحيوية يمكن أن تحجب التلوث ويمكن أن تنتشر العدوى.)
ما هي طرق التحقيق التي يمكن استخدامها لتتبع العدوى؟
من أخطر الأشياء المتعلقة بعدوى الميكوبلازما أنها غالبًا ما تظل غير مكتشفة لفترة طويلة. من حيث المبدأ ، يمكن التحكم في أحداث التلوث وتتبعها من خلال مجموعة متنوعة من الأساليب ، بعضها متطور للغاية والبعض الآخر أقل تعقيدًا.

يمكن لفني مختبر متمرس معرفة ما إذا كان التلوث المتبادل قد حدث ببساطة عن طريق النظر تحت المجهر.
إذا استخرجنا كل الحمض النووي من مزرعة خلوية ، فيمكن استخدام طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل للكشف عن محتوى الحمض النووي للميكوبلازما.
يجب أن تتحقق المختبرات التي تجري عمليات النقل الفيروسي أو الاختبارات الحيوية من التلوث الفيروسي.
يجب أن تتحقق المختبرات التي تصنع الأدوية للعلاجات الجديدة من انخفاض مخاطر الإصابة بالبكتيريا والجراثيم والفطريات والميكوبلازما وفيروس نقص المناعة البشرية وفيروس التهاب الكبد الوبائي ومرض جنون البقر.

كيف يجب التعامل مع التلوث؟
يجب توثيق كل حالة تلوث وتصنيفها. إذا لم يكن هناك شيء آخر ، فإن المعامل الطبية التي تحافظ على مشاكل التلوث في طي الكتمان تعرض سمعتها الجيدة للخطر.

بالطبع ، يجب أيضًا اتخاذ إجراءات تنظيف خاصة في حالة التلوث: في حالة العدوى الفطرية ، يُنصح بالتحقق من أن المختبر يتم تطهيره بانتظام بعامل كحولي
كقاعدة عامة ، يتم استخدام الرش المنتظم أو التطهير بالمسح. يساعد الجزء الداخلي للحاضنة العلمية بمحلول قائم على الكحول على تجنب التلوث
يعد التعقيم الشهري للهواء الساخن ممارسة طبية قياسية في العديد من المختبرات
بالنسبة للخلايا الجذعية الحساسة ، في حالات نادرة فقط يمكن معالجة خطوط الخلايا المصابة بالمضادات الحيوية. في معظم الحالات ، يكون الحل مكلفًا - يجب إلغاء الثقافة وبدء العمل من الصفر
في الخاتمة:
تعد القدرة على اكتشاف التلوث والتحقق منه والتعامل معه باستمرار أمرًا ضروريًا للغاية ، خاصة في المختبرات الطبية التي تعمل مع الخلايا الجذعية شديدة الحساسية ولا تستخدم المضادات الحيوية. المراقبة الشفافة ضرورية. إن التستر على التلوث أو السماح له بالانتشار يزيد من الخطر فقط وهو غير ضروري. يجب أن تكون حاضنة درجة الحرارة الثابتة دائمًا المكون الأكثر أمانًا في خطوة العملية بأكملها ؛ إذا كانت العينة ملوثة ، فإن هذا يحدث في معظم الحالات إما في بداية أو بعد زراعة حاضنة التبريد .