في المختبر الطبي ، فإن خطر تلوث مزارع الخلايا لا يقاس - بغض النظر عن مدى دقة العمل. من المؤكد أن سوء تقدير المخاطر لم يسمع به من قبل ، وغالبًا ما يؤدي التلوث إلى خسارة ثقافية. لذلك ، في هذه المدونة ، نريد إلقاء الضوء على كيفية اكتشاف وتجنب التلوث في خطوط الخلايا بشكل منهجي.
يتعرض كل مختبر طبي للتهديد يومًا بعد يوم
إن التلوث الميكروبي في مزارع الخلايا - بما في ذلك تلك المشتراة من أطراف ثالثة - ليس نادرًا في المختبرات. في الواقع ، العكس هو الصحيح: العديد من سلالات الخلايا المزروعة في المختبر مصابة بالميكوبلازما. تنتشر الجراثيم الفطرية الصغيرة في كل مكان ويمكن أن تنتشر في الهواء. بالطبع ، عند العمل في بيئة معقمة ، هناك مجال للخطأ البشري. من السهل ارتكاب الأخطاء.
سيناريوهات الرعب في مختبرات زراعة الخلايا - أنواع مختلفة من التلوث:
التلوث الجرثومي (البكتيريا ، الميكوبلازما ، الفطريات ، الخميرة ، إلخ.)
التلوث بالفيروسات التلوث
بالبروتين (البريون)
التلوث الكيميائي (المواد المرتشحة والمواد المستخلصة من البلاستيك والمعادن الثقيلة ، إلخ.
) التلوث بمزارع الخلايا الأخرى من
أين يأتي التلوث؟
1. كيف كانت الثقافة البدائية "نظيفة"؟
عادة ما تبدأ المشاكل مع المادة الأصلية. حتى مع بذل أفضل الجهود في إنتاج الوسائط ، لا يمكن أن تكون بعض المواد معقمة تمامًا. لذلك ، هناك دائمًا خطر انزلاق الميكوبلازما عبر المرشح المعقم. يمكن أن تنجو البريونات حتى من التعقيم بالبخار عند 121 درجة مئوية.
2. هل معمل العمل حقا بيئة معقمة؟
أحد الأسباب الرئيسية للتلوث المختبري هو جسم الإنسان. على سبيل المثال ، يمكن تجنب الكثير من التلوث المتبادل إذا تجنب فنيو المختبرات العمل على خطوط إنتاج متعددة في نفس الوقت على منضدة معقمة. يمكن أن تصيب إحدى الثقافات الأخرى بسرعة إذا لم يتم التعامل مع السائل بشكل صحيح.
كما أن التسرع هو ألد أعداء العمل العقيم. لا ينبغي ترك باب حاضنة ثاني أكسيد الكربون مفتوحًا دون سبب ، وبالتأكيد ليس لفترات طويلة من الزمن. يجب أن يعمل فنيو المختبرات على خط خلية واحد فقط في كل مرة ، بغض النظر عن مقدار الوقت الذي يتعرضون فيه للضغط. عند تفريغ الماصات التي تُستخدم مرة واحدة أسفل المقعد ، بمجرد فك الغطاء ، يجب وضع الغطاء جانبًا - الكلمة الرئيسية: الممارسة المعملية الجيدة (GLP).
لمزيد من المعلومات ، اقرأ منشور المدونة الخاص بنا: "خمسة تطبيقات مثيرة لحاضنات ثاني أكسيد الكربون".
3. هل تستخدم معدات المختبر الصحيحة؟
بالطبع ، من الممكن تمامًا أنه حتى المعدات المستخدمة في المختبرات الطبية يمكن أن تؤدي إلى تلوث مزارع الخلايا. لذلك ، نوصي بما يلي:
استخدام حاويات بلاستيكية بدون مواد ملدنة
اختر المكان المناسب
لحاضنة العفن
(المواقع القريبة من حوض المغسلة يمكن أن تؤدي إلى تلوث الصابون)
استخدم ملحقات الحاضنة المصنوعة من نحاس المبيدات
الحيوية عند استخدام المضادات الحيوية ، يجب زراعة سلالات خالية من المضادات الحيوية من وقت لآخر . (هذا لأن المضادات الحيوية تحجب التلوث ، ويمكن أن تنتشر العدوى).
ما هي طرق التحقيق التي يمكن استخدامها لتتبع العدوى؟
إن أخطر شيء بخصوص عدوى الميكوبلازما هو أنها غالبًا ما يتم اكتشافها لفترات طويلة من الزمن. من حيث المبدأ ، يمكن التحكم في أحداث التلوث وتتبعها بعدة طرق ، بعضها معقد للغاية والبعض الآخر أقل تعقيدًا.
يمكن لفنيي المختبرات ذوي الخبرة معرفة ما إذا كان التلوث المتبادل قد حدث ببساطة عن طريق النظر من خلال المجهر.
إذا استخرجنا كل الحمض النووي من مزرعة الخلية ، فيمكن اكتشاف محتوى الحمض النووي للميكوبلازما باستخدام طرق تفاعل البوليميراز المتسلسل.
يجب أن تتحقق المختبرات التي تجري عمليات النقل الفيروسي أو الاختبارات الحيوية أيضًا من التلوث الفيروسي.
يجب أن تتحقق المختبرات التي تصنع الأدوية للعلاجات الجديدة من البكتيريا والجراثيم والفطريات والميكوبلازما وفيروس نقص المناعة البشرية وفيروس التهاب الكبد الوبائي ومرض جنون البقر منخفضة المخاطر.
كيف يجب التعامل مع التلوث؟
يجب تسجيل كل حالة تلوث وتصنيفها. إذا لم يكن هناك شيء آخر ، فإن المعامل الطبية التي تخفي مشاكل التلوث تحت السجادة تعرض سمعتها الجيدة للخطر.
بالطبع ، في حالة التلوث ، يجب أيضًا اتخاذ تدابير تنظيف خاصة: في حالة العدوى الفطرية ، يُنصح بالتحقق مما إذا كان المختبر يتم تطهيره بانتظام بكواشف تحتوي على الكحول
كقاعدة عامة ، التطهير المنتظم بالرش أو سيساعد مسح وتطهير الجزء الداخلي للحاضنة بكواشف كحولية على تجنب التلوث
التطهير الشهري بالهواء الساخن هو ممارسة طبية معتادة في العديد من المختبرات
. في حالة الخلايا الجذعية الحساسة ، لا يمكن معالجة سلالات الخلايا المصابة بالمضادات الحيوية إلا في حالات نادرة. في معظم الحالات ، يكون الحل مكلفًا - يجب إلغاء الثقافة ويجب أن يبدأ العمل من نقطة الصفر.
ختاماً:
تعد القدرة على اكتشاف التلوث والتحقق منه والتعامل معه باستمرار ضرورة مطلقة ، خاصة في المختبرات الطبية التي تستخدم خلايا جذعية شديدة الحساسية ولا تستخدم المضادات الحيوية. المراقبة الشفافة أمر بالغ الأهمية. إن التستر على التلوث أو السماح له بالانتشار يزيد من الخطر فقط وهو غير ضروري. يجب أن تكون الحاضنة دائمًا المكون الأكثر أمانًا خلال خطوات العملية ؛ إذا كانت العينة ملوثة ، يحدث هذا في معظم الحالات في أعلى أو أسفل ثقافة الحاضنة.
وفقًا للنطاق المختلف للتحكم في درجة الحرارة ، يتم تطبيق
حاضنات المختبرات
في مجالات مختلفة.
ثشمبر
لديها حاضنة كيميائية حيوية ، تستخدم على نطاق واسع في أقسام البحث والإنتاج مثل حماية البيئة ، والصرف الصحي والوقاية من الأوبئة ، والزراعة ، والثروة الحيوانية والمنتجات المائية ، واختبار الأدوية ، وزراعة الخلايا ، إلخ.